RIEGO Desarrollo de las plántulas Al comienzo del ensayo, fueron seleccionadas 9 plántulas por réplica y tratamiento para cada una de las determinaciones: altura, peso fresco de la parte aérea y compuestos bioquímicos. La deter- minación del peso fresco de la parte aérea se realizó a partir de 30 taleolas de 1,5 cm de diámetro de las hojas de 9 plantas. Para los análisis bioquímicos, las hojas se congelaron en nitrógeno líquido y se guardaron trituradas a -80 °C hasta su posterior análisis. Actividad antioxidante de las plántulas A partir de 2,5 g de material vegetal se evaluó el contenido en vita- mina C mediante cromatografía líquida (HPLC), el contenido en compuestos fenólicos totales con 6,25 ml de MeOH al 50% con 4 mM NaF mediante la reducción del reactivo Folin-Ciocalteau y a partir de los extractos de compuestos fenólicos totales se deter- minó la capacidad antioxidante mediante el ensayo del DPPH (Martínez-Sánchez et al., 2008). La actividad catalasa se determinó según la metodología descrita por Bortolin et al., (2014). La pero- xidación lipídica se evaluó tras la extracción de 0,5 g de muestra vegetal con 2,5 ml de ácido tricloroacético al 10 % (Hernández and Almansa, 2002). Estudio estadístico Se llevó a cabo un análisis de la varianza (ANOVA) para compa- rar los distintos tratamientos a un nivel de significancia P ≤ 0,05 mediante el programa estadístico SPSS 23 (Chicago, IL, USA). Se aplicó el test de Tukey para evaluar las diferencias significativas entre tratamientos. Resultados y discusión La altura de las plántulas de sandía y calabaza, previo al injerto, aumentó con el tratamiento de agua electrolizada respecto al tes- tigo (Tabla 1). Igualmente, ese tratamiento proporcionó un ligero mayor peso fresco en las plántulas de calabaza. Las plántulas de sandía injertada, previo al trasplante en campo, mostraron un desarrollo de la parte aérea similar en todos los tratamientos de riego, posiblemente por el reducido volumen del alveolo de la ban- deja que limita el potencial de crecimiento de las plántulas (Tabla 1). Estudios previos han mostrado como el riego con agua ozonizada (1 ppm) y 2 dS m-1 de salinidad aumentó el peso fresco de los frutos de pepino (Peykanpour et al., 2015) o como un tratamiento con 1,5 ppm de ozono en cultivo hidropónico logró incrementar el número de flores en plantas de tomate (Ohashi-Kaneko et al., 2009). En relación a la vitamina C, las plántulas de sandía injertada regadas con agua ozonizada presentaron un mayor contenido en vitamina C que en el resto de tratamientos (Figura 1A). Por el contrario, las plántulas de sandía y calabaza, previo al injerto, no mostraron diferencias significativas en el contenido en vita- mina C entre los distintos tratamientos de riego empleados. El agua ozonizada, proporcinará el mayor contenido en polifenoles totales y capacidad antioxidante en las plántulas de sandía y calabaza (Figuras 1B y 1C). No obstante, en las plántulas de san- día injertada no se observaron diferencias significativas entre los diferentes tratamientos de riego. Otros autores también han señalado que el riego con agua ozonizada puede estimular la producción de compuestos secundarios como mecanismo de defensa, como los compuestos polifenólicos (Nicoletto et al., 2017) y otras moléculas fomentando el incremento en la capaci- dad antioxidante de las plantas tratadas (Zhang et al., 2009), sin oxidar la vitamina C presente (Baier et al., 2005). Con respecto a la enzima catalasa se observó una mayor actividad en las plántulas de sandía y calabaza regadas con agua testigo, sin detectarse diferencias entre los tratamientos higienizantes (Figura 2). Sin embargo, en plántulas de sandía injertadas se determinó una mayor actividad catalasa en las muestras tratadas con agua ozo- nizada respecto a las tratadas con agua electrolizada (Figura 2). El incremento en la actividad catalasa es un mecanismo de defensa de la planta en respuesta a un estrés abiótico ligero (Caregnato et al., 2013), aumentando la síntesis de compuestos antioxidantes como se ha descrito anteriormente. 83 Tabla 1. Crecimiento de las plántulas de sandía (día 28 tras la siembra), calabaza (día 23 tras la siembra) y sandía injertada (29 días tras el injerto) con diferentes tratamientos de riego. Parte aérea Plántulas Tratamientos Altura Peso fresco Sandía Testigo 8,98 ± 0,93b 1,27 ± 0,12ns Agua electrolizada 9,54 ± 0,88a 1,20 ± 0,03ns Agua ozonizada 8,72 ± 0,86b 1,35 ± 0,25ns Calabaza Testigo 18,08 ± 1,44b 0,91 ± 0,05b Agua electrolizada 19,25 ± 1,01a 1,06 ± 0,05a Agua ozonizada 18,56 ± 1,62ab 1,01 ± 0,04ab Sandía injertada Testigo 18,34 ± 2,65ns 0,60 ± 0,03ns Agua electrolizada 18,02 ± 2,38ns 0,63 ± 0,06ns Agua ozonizada 17,71 ± 1,65ns 0,63 ± 0,06ns Valores medios ± desviación estándar. Altura n=27; peso fresco n=3. Letras diferentes en la misma columna (sandía, calabaza o sandía injertada) indican diferencias significativas entre los tratamientos de riego (testigo, agua electrolizada y agua ozonizada) con p ≤ 0.05. NS, no significativo.