32 CÍTRICOS Estrategia de cruzamiento Cruzamiento ( X ) Respuesta a ABS esperada en híbridos diploides Respuesta a ABS esperada en híbridos triploides Entre parentales diploides (2x X 2x) AAXAA AAXAa AaXAA AAXaa aaXAA 100% susceptibles 100% susceptibles AaXAa 25% resistentes 20% resistentes AaXaa 50% resistentes 40% resistentes aaXAa 50% resistentes 50% resistentes aaXaa 100% resistentes 100% resistentes Entre parentales diploides y tetraploides (2x X 4x / 4x X 2x) AAAA X AA AAAA X Aa AAAA X aa AAaa X AA aaaa X AA - 100% susceptibles AAaa X Aa - 10% resistentes AAaa X aa - 20% resistentes aaaa X aa - 100% resistentes Tabla 1. Proporciones de híbridos diploides y triploides susceptibles y resistentes esperados en cada tipo de cruzamiento. como son 'Dancy' y 'Minneola', transmiten la sensibilidad a toda su descendencia, de forma que todos los híbridos directos obtenidos a partir de ellas serán susceptibles a ABS, independientemente del otro parental utilizado en el cruzamiento. Las variedades resisten- tes (aa) producen todos sus híbridos resistentes cuando se cruzan entre sí, aunque esta estrategia limita notablemente el número de posibles parentales a utilizar, lo que puede conllevar a prescindir de algunas características agronómicas y organolépticas impor- tantes presentes en estas variedades. (Navarro et al., 2015). La mayoría de las variedades susceptibles a ABS cultivadas comercial- mente presentan una configuración genética Aa, como es el caso de 'Fortune', 'Nova' o 'Murcott', por lo que en las poblaciones de híbridos obtenidas a partir de estas variedades se pueden encon- trar individuos resistentes y susceptibles. Estas consideraciones son aplicables a programas de mejora genética basados tanto en obtención de híbridos diploides como triploides. Sin embargo, las proporciones entre híbridos susceptibles y resistentes que se obtienen de cada cruzamiento varían según la estrategia utilizada. A nivel diploide, la herencia de la susceptibili- dad sigue una segregación mendeliana clásica, de forma que estas proporciones son previsibles y relativamente sencillas de calcular. En cuanto a la estrategia de obtención de híbridos triploides, en nuestro grupo hemos desarrollado prácticamente todo el conoci- miento sobre la genética de la susceptibilidad a ABS que se trasmite en las poblaciones triploides. En este caso, las proporciones entre híbridos triploides susceptibles y resistentes que se obtienen dependen de (i) el tipo de estrategia empleada en la obtención de los híbridos triploides (diploide X diploide, tetraploide X diploide o diploide X tetraploide); (ii) en el caso de cruzamientos diploide X diploide, del mecanismo de origen (SDR o FDR) de los híbridos triploides obtenidos y (iii) de la posición del gen responsable de la susceptibilidad a ABS dentro del cromosoma. En nuestro grupo hemos demostrado que el mecanismo de origen de los híbridos triploides obtenidos en cruzamientos diploide X diploide es mayo- ritariamente de tipo SDR, transmitiendo doble información del parental femenino (Cuenca et al., 2011; 2015) y hemos localizado el gen responsable de la susceptibilidad a ABS a 10 cM del centró- mero en el cromosoma III del mapa genético de los cítricos (Cuenca et al., 2013). Toda esta información nos permite actualmente esti- mar las proporciones de híbridos susceptibles y resistentes que se van a obtener en cada tipo de cruzamiento (Tabla 1) y, por tanto, seleccionar la estrategia más adecuada para la obtención de híbri- dos triploides resistentes a Alternaria. Métodos biológicos de evaluación de resistencia a ABS Para la evaluación de la respuesta de las variedades a la infección por el hongo, se realizan generalmente tres ensayos. El primer ensayo consiste en la observación de síntomas en hojas y frutos en árboles cultivados en campo con un alto nivel de inóculo. Estos ensayos de campo permiten cuantificar el grado de susceptibilidad de las variedades sensibles, además de identificar las variedades que no muestran ningún síntoma. En el IVIA se dispone de parce- las diseñadas específicamente para inducir condiciones altamente favorables para la enfermedad con una elevada presión de inóculo. Sin embargo, el desarrollo epidémico de la enfermedad sobre una variedad en campo depende de otros factores, además de la sus- ceptibilidad genética, como son la capacidad de esporulación en las lesiones y la duración del período infectivo (Reis et al., 2007; Vicent et al., 2008). El segundo ensayo de respuesta a ABS consiste en la inoculación in vitro de hojas jóvenes mediante una solución de esporas del hongo. Este ensayo es relativamente rápido y sencillo, permitiendo obtener resultados en 48-72 horas. Sin embargo, se requiere disponer de hojas en un estado de desarrollo adecuado para favorecer la infección. Cabe destacar que esta técnica es muy agresiva, por lo que algunas variedades resistentes podrían mos- trar algunas pequeñas reacciones de susceptibilidad. No obstante, si no se observan síntomas en estos ensayos, se puede afirmar que la variedad será resistente en condiciones de campo (Vicent et al.,