68 Material y métodos Los frutos maduros de la variedad Navelate (C.sinensis L. Osbeck) se cosecharon de una parcela comercial en Lliria, Valencia. Los frutos estaban libres de defectos en la piel y se transportaron inmediatamente al laboratorio, donde se dividieron en 3 réplicas de lotes duplicados (uno para evaluación de CC y otro para obtención de muestras de flavedo) de 30 y se sometieron a los si- guientes tratamientos: frutos mantenidos durante 8 d a 30% HR; frutos mantenidos durante 8 d al 90% HR; fru- tos mantenidos 4 d a 30% HR y transferidos a 90% HR 4 d más. La temperatura de almacenamiento fue de 20°C. A intervalos regulares se evaluó el índice de daños en la piel y la pérdida de peso en los frutos como ya se ha descrito anteriormente (Alferez et al., 2003). Además se aislaron muestras de flavedo, se congelaron en N2 lí- quido y se almacenaron para su posterior análisis. En co- laboración con la compañía Bioarray se diseñó, con tecnología Agilent, una micromatriz personalizada de cí- tricos en la que se incluyeron los 46147 ESTs descritos en la base de datos ‘citrusgenomedb.org’ recientemente publicada. La micromatriz se hibridó con muestras de cDNA de flavedo de frutos rehidratados después de haber sufrido estrés hídrico severo (4d 30% +4d 90% HR), y de sus respectivos controles a alta (90%) y baja (30%) HR. En este trabajo se han estudiado los cambios en expresión génica global en la piel de frutos rehidratados después de haber sufrido estrés hídrico severo Resultados y discusión Los resultados de la hibridación muestran un total de 1.528 genes expresados diferencialmente en los frutos almacenados 8 días al 30% HR con respecto a los frutos recién cosechados (Fig. 2). De éstos, un 27,48% (420 genes) se sobreexpresaron en esta condición mientras Figura 2: Diagrama de Venn que muestra el número de genes inducidos (negrita) o reprimidos (cursiva) en respuesta al estrés hídrico severo (30 % HR) y a la re- hidratación de frutos previamente sometidos a deshidratación (4d 30% HR + 4d 90% HR). Las comparaciones se realizaron con respecto a los frutos recién cosechados (FH). que un 72,52% (1.108) estuvieron infrarrepresentados. Por otra parte, el número de genes expresados diferen- cialmente en frutos transferidos al 90 % HR después de haber sido sometidos a un estrés hídrico severo (4d 30 % HR+ 4d 90 % HR) fue similar (1.489). En esta condi- ción también predomina la represión (987 genes reprimi- dos frente a 502 inducidos). Al comparar los genes diferenciales en ambas condiciones sólo 182 se induje- ron en ambos casos mientras que aproximadamente el 43% (650) se reprimieron. Estos resultados indican que aunque la rehidratación de frutos previamente deshidratados puede modular meca- nismos moleculares comunes a los que se producen como consecuencia de una deshidratación severa, tam- bién modula otros que se producen exclusivamente en esta condición de cambio de HR y el número de genes que se expresan diferencialmente de forma exclusiva en cada condición predomina sobre los comunes a ambas condiciones (Fig. 2). El análisis bioinformático (FatiGO+) nos permitió comparar los procesos biológicos infra o so- brerrepresentados en los frutos sometidos a deshidrata- ción constante y severa con respecto a aquellos que se han rehidratado (Tabla 1). De estos resultados, junto con los derivados de la visualización, utilizando el programa MAPMAN, de los cambios metabólicos que tienen lugar poscosecha